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现代生物医学进展
题名:酿酒酵母遗传缺陷型菌株化学转化方法研究
作者:崔铁忠; 卢康荣; 李
出版年:2016
卷期:08
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分类:总论
内容摘要:目的:通过改善转化条件提高缺陷型酿酒酵母DNA转化效率。方法:以醋酸锂化学转化法为基础以酿酒酵母菌株fab1::KAN作为遗传转化受体以敲除MZM1基因为转化目的对影响遗传缺陷型菌株转化效率的参数(醋酸锂前处理、热激时间及转化后复苏时间)进行优化确定适合缺陷型酵母DNA转化的最佳方法。结果:不同时间(30 min60 min和120 min)醋酸锂的前处理均可以提高其转化效率热激前使用醋酸锂处理酵母30 min转化效率最高;热激10 min是转化效率由高到低的转折点30 min热激明显降低了转化效率;YPD培养基用于转化后酵母的复苏随培养时间(30 min60 min和120 min)的延长酵母转化效率逐步增加120 min作为热敏性菌株转化后的复苏时间较佳。结论:与野生型菌株类似通过转化条件的优化遗传缺陷型菌株的转化效率也可以满足大多数试验要求。 更多还原
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